My Mister mengisahkan tentang tiga orang saudara laki-laki paruh baya yang menanggung beban hidup yang cukup berat.
Sementara itu, karakter yang IU perankan merupakan wanita yang memiliki karakter kuat namun dingin dan menjalani hari-harinya yang sulit. Mereka kemudian bersatu dan berusaha memahami arti hidup sembari menyembuhkan luka satu sama lain.